厭氧培養(yǎng)箱*

　厭氧培養(yǎng)箱注意事項：盡可能地安裝于空氣清靜，溫度變化較小的地方。開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的說明書、掌握正確的使用方法。培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境后放入。如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。（超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體。真空泵按要求使用，定期檢查加油。停止使用，關(guān)閉總電源鍵，及設(shè)備后部的電源開關(guān)。

　　QSYY-120厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進行細菌培養(yǎng)及操作的裝置。它能提供嚴格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學(xué)化的工作區(qū)域。在本裝置內(nèi)操作培養(yǎng)，可以培養(yǎng)z難生長的厭氧生物，又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器，如改變操作方式，為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。

　　厭氧培養(yǎng)箱的使用注意事項

　　1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;

　　2.開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法;

　　3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境后放入;

　　4.如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持10小時厭氧狀態(tài)（超過10小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）;

　　5.經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;

　　6.調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體。

　　7. 真空泵按要求使用，定期檢查加油。

　　操作室厭氧環(huán)境形成

　　1 按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。

　　2 通電源開照明燈，開控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。

　　3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。

　　4 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗。

　　5 操作室內(nèi)DI一次置換（氮氣置換）：

　?。?）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋。

　?。?）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口。

　?。?）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。

　?。?）把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi)，至全部放出。

　　6 操作室DI二次置換（氮氣置換）重復(fù)一次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。

　　7 操作室DI三次置換（混合氣體置換）：

　?。ɑ旌蠚怏w配比為：N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%）

　?。?）調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣。

　?。?）混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。

　?。?）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。

　?。?）通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

　　8 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一 小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變況，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。

　　9 開紫外線滅菌燈，室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間自定。

　　厭氧菌培養(yǎng)方法

　　厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養(yǎng)厭氧菌，必須創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑，或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧，以降低氧化還原電勢。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基，牛心腦浸液培養(yǎng)基等。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多，可根據(jù)實際情況選用。

　　1．厭氧缸法接種好標(biāo)本的平板或液體培養(yǎng)基試管，可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng)，厭氧缸是普通的干燥缸，用物理化學(xué)的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境，從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。

　　2．厭氧袋（Bio-bag）即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣，內(nèi)裝氣體發(fā)生管（有碳酸氫鈉固體以及5%檸檬酸安瓿）、美蘭指示劑管、鈀催化劑管、干燥劑。放入已接種好的平板后，盡量擠出袋內(nèi)空氣，然后密封袋口。先折斷氣體發(fā)生管，后折斷美蘭指示劑管，命名袋內(nèi)在半小時內(nèi)造成無氣環(huán)境。如不突變表示袋內(nèi)已達厭氧狀態(tài)，可以孵育。

厭氧培養(yǎng)箱*